产品货号:
KD1708
中文名称:
昆虫基因组DNA快速提取试剂盒
英文名称:
Insect gDNA Extract kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品适用于从昆虫、节肢动物、蛔虫和扁形虫等富含多糖的动物组织中提取基因组DNA,适用于新鲜、冷冻或固定液中保存的样品。
组分 | 规格 |
Proteinase K | 500μL |
裂解液I | 50mL |
裂解液II | 25mL |
结合液III | 75mL |
洗涤液 | 50mL |
洗脱液 | 10mL |
硅胶膜DNA吸附柱 | 50套 |
保存:室温,有效期1年,其中Proteinase K置于-20℃。
氯仿,2mL离心管。
昆虫种类较多,其处理难易程度和DNA产率各不相同,所有试验需先做预实验,再批量提取DNA。
- 样品处理:
- 65℃预热裂解液I,待沉淀溶解后充分混匀,取1mL裂解液I加入到2mL离心管中并置于65℃(金属浴或水浴)。
- 液氮研磨昆虫样品,将0.2~0.4g样品加入到装有裂解液I的离心管中,震荡器上剧烈震荡5~10min。
- 加入10μL的Proteinase K,上下颠倒30秒充分混匀,65℃保温1小时,期间震荡2~3次。
- 如样品处理量较大,可按比例增大样品和提取液,要保证震荡充分。对于柔软而微量组织,可以不经过研磨,用研磨杵捣碎后加入裂解液处理。
- 65℃预热裂解液I,待沉淀溶解后充分混匀,取1mL裂解液I加入到2mL离心管中并置于65℃(金属浴或水浴)。
- DNA纯化:
- 12000rpm室温离心3min,将上清液约800μL转移到新的离心管中。
- 在上清液中加入500μL的裂解液II,震荡器上震荡30秒充分混匀,溶液将呈白色或其他颜色混浊状。
- 12000rpm室温离心3min,转移上清到新的离心管中。
- 加入0.3mL的氯仿(自备),震荡器上充分振荡30秒混匀。
- 12000rpm室温离心3min,小心转移0.6mL上清到新离心管中。
- 12000rpm室温离心3min,将上清液约800μL转移到新的离心管中。
- 基因组DNA收集:
- 在步骤B所得的上清中加入1.2mL结合液III(上清体积的2倍,可根据样品样增减),颠倒数次混匀后,分两次上DNA吸附柱,每次上柱后均先室温放置2min,然后12000rpm离心1min,倒掉穿透液。
- 在吸附柱中加入500μL洗涤液,12000rpm离心1min,弃穿透液。重复洗涤一次。
- 再将吸附柱12000rpm离心1min以甩干乙醇(空管离心)。
- 将吸附柱放入一个干净的1.5mL离心管中。在吸附柱中央加入50μL洗脱液(65~70℃预热),室温静置2min。12000rpm离心2min。将穿透液重新加入吸附柱中央,12000rpm离心1min以洗脱更多基因组DNA。
- 检测DNA质量。将所得的基因组DNA保存于-20℃冰箱。
- 在步骤B所得的上清中加入1.2mL结合液III(上清体积的2倍,可根据样品样增减),颠倒数次混匀后,分两次上DNA吸附柱,每次上柱后均先室温放置2min,然后12000rpm离心1min,倒掉穿透液。
相关搜索:昆虫基因组DNA快速提取试剂盒,节肢动物DNA提取,昆虫DNA提取,Insect gDNA Extract kit